Projeto de construção de laboratório de PCR

A ampla aplicação da tecnologia PCR levou a uma atenção crescente à concepção e construção de laboratórios de PCR.
Um laboratório PCR típico consiste em quatro áreas: a área de reserva de reagente, a área de preparação de amostra, a área de amplificação e a área de análise do produto.A área de reserva de reagente desempenha principalmente as funções de armazenamentoA pressão do ar nesta área deve ser mantida numa pressão positiva em relação ao exterior.Os reagentes e materiais armazenados e preparados na área de reserva de reagentes não devem passar por outras áreas.Os reagentes e as matérias-primas devem ser armazenados e preparados nesta área.Lâmpadas ultravioletas móveis, etc. Para assegurar a segurança do pessoal do laboratório, o banco de ensaio deve ser colocado em ambos os lados da sala,com o corredor do meio levando diretamente ao corredor para facilitar a evacuação.

A função da área de preparação das amostras é a de preservar as amostras, extrair e armazenar os ácidos nucleicos, adicionar as amostras aos tubos de reação de amplificação e medir a síntese do ADN.As amostras devem ser transportadas directamente para esta área e armazenadas nela.Para evitar a contaminação por aerossóis, esta área deve manter uma pressão negativa em relação ao exterior.Em comparação com a área de preparação e amplificação da mistura de reação de amplificação, bem como com a área de análise do produto de amplificaçãoAs operações realizadas na área de preparação das amostras incluem gabinetes de segurança biológica, pipetas,Centrífugas de alta velocidade de banco, centrífugas de baixa velocidade, vasos de banho de água, frigoríficos, misturadores e lâmpadas ultravioletas móveis, etc.

A função da zona de amplificação é a amplificação do ADN e a determinação de fragmentos amplificados.A mistura de reação (da área de armazenamento e preparação do reagente) pode ser preparada na mistura de reação e o modelo de ADN preparado (da área de preparação da amostra) também pode ser adicionado.Para o controlo da pressão do ar, é necessária uma pressão negativa em relação às zonas adjacentes, para evitar a fuga de aerossóis desta zona.Para evitar a contaminação por aerossóisAlgumas operações, tais como a adição de amostras, devem ser realizadas no capô de fluxo laminar.O equipamento nesta área inclui principalmente o instrumento de ciclo térmico de amplificação de ácidos nucleicos, pipetas, capas de fluxo laminar, etc. The power supply of the thermal cycling instrument should be dedicated and equipped with a stable voltage power supply or UPS to prevent the influence of voltage fluctuations on amplification determination.

A função da área de análise de produtos é analisar os produtos amplificados. Esta área pode utilizar certas substâncias tóxicas que podem causar mutações genéticas.Deve ser prestada especial atenção à protecção da segurança do pessoal do laboratório.Para o controlo da pressão do fluxo de ar, esta área é o último passo do experimento PCR. A pressão deve ser a mais baixa, com uma pressão negativa em comparação com as áreas adjacentes,para evitar que os aerossóis escapem desta áreaPara evitar a contaminação causada por aerossóis, os movimentos desnecessários dentro desta área devem ser minimizados.aparelho de transferência eletroforético, fornos ou caixas de hibridação, câmaras de banho de água, sequenciadores de ADN, leitores de microplacas e máquinas de lavar roupa, etc.